膜式血浆分离器血浆置换联合激素及免疫抑制剂治疗血栓性血小板减少性紫癜的疗效观察

目的 观察膜式血浆分离器行血浆置换(PE)联合激素及免疫抑制剂治疗,对血栓性血小板减少性紫癜(TTP)的疗效.方法 选取2013年1月-2014年2月在中南大学湘雅医院确诊为TTP并接受PE联合激素及免疫抑制剂治疗的住院患者9例,观察PE治疗前后患者临床症状及各项实验室指标的变化.结果 8例患者存活(5例完全缓解、3例好转),1例患者(原发性TTP合并多器官功能衰竭)PE 1次后死亡.PE治疗后患者神经系统症状有不同程度减轻,体温恢复正常;尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)无明显变化;血红蛋白(Hb)、血小板计数(Plt)较治疗前升高(P＜0.01);乳酸脱氢酶(LDH)、间接胆红素(IBIL)较治疗前降低(P＜0.01).结论 膜式血浆分离器行PE联合激素及免疫抑制剂治疗对TTP患者疗效明显.     

职业性汞中毒观察对象的驱汞治疗

目的对职业性汞中毒观察对象进行现场驱汞治疗。方法选取嵊泗县三家以生产汞温度计为主的医疗有限公司尿汞浓度x≥0·05mg/L企业职工为对象。根据尿汞浓度0·05≤x<0·08、0·08≤x<0·15、0·15≤x<0·2、x≥0·2(mg/L)分成4个治疗小组,统一询问既往史、职业史、个人卫生习惯、症状等,并作一般内外科、肝肾功能、心电图和血常规检查。排除肝脏、肾脏功能异常的职工后,确定147名职业性汞中毒观察对象进行三巯基丁二酸口服驱汞治疗,由职业病防治专家现场为企业制定职工驱汞治疗方案,治疗前和每个疗程后进行尿汞测定。结果除2名因药物不良反应中断治疗外,145名职业性汞中毒观察对象完成全程治疗。4个治疗小组第1组驱汞后尿汞浓度升高人数显著多于降低人数,差值均数为正且数字较大;第2组驱汞后尿汞浓度升高人数比降低人数多,差值均数为正,升高程度小于第1组;第3、4组尿汞浓度升高人数低于降低人数,差值均数为负,升高程度第4组高于第3组。人均驱汞量估算值大于5·108±3·268mg/人。随访一年,无一例职业性汞中毒病人发生。结论职业性汞中毒观察对象的现场驱汞治疗是安全、经济的。     

湖南省长沙县慢性肾脏病的流行病学研究

目的 研究我国中南地区长沙县农村人群中慢性肾脏病（CKD）的患病情况及相关危险因素。 方法 在湖南省长沙县采用分层多级随机抽样的方法,抽取果园镇、安沙镇及干杉乡20岁以上的常住居民1950人,进行CKD及相关危险因素的问卷调查、体格检查和血尿检测。 结果 在资料完整的1727名居民中,经过人口年龄、性别构成比校正后,白蛋白尿的患病率为8.5%;血尿的患病率为5.1%;肾功能下降的患病率为1.5%。该人群CKD的患病率为14.6%, 知晓率为16.5%。多因素Logistic 回归提示,年龄增加10岁、高胆固醇血症、高三酰甘油血症、高血压和糖尿病与白蛋白尿独立相关;女性、年龄增加10岁、高三酰甘油血症和高尿酸血症与肾功能下降独立相关;女性与血尿独立相关。 结论 在我国经济迅速发展的中南地区农村中,人群CKD的患病率为14.6%,知晓率为16.5%,CKD的疾病谱与我国大城市和发达国家类似。     

湖南省某乡村成年人群中代谢综合征与慢性肾脏病的关系

目的 研究中国南方某乡村成年人群代谢综合征(MS)和慢性肾脏病(CKD)的关系.方法 在湖南省某乡村采用分层多级随机抽样的方法,抽取18岁以上的常住居民1953人,进行MS组分、肾脏损伤指标及其他相关危险因素的问卷调查和检测.结果 在资料完整的1709名居民中,用年龄、性别及MS组分校正后.有MS的参与者CKD的患病率比没有MS的参与者高(19.3% vs.13.2%,P＜0.001).CKD患病率随MS组分数的增多而升高.MS与CKD之间存在强而独立的关联.不合并高血压和糖尿病的参与者,MS也与CKD有关(OR=1.733,95%CI:1.20～2.41,P=0.004).结论 中国南方某乡村1709名研究对象中,MS与CKD存在关联.     

Smad锚着蛋白在糖尿病肾病肾小管上皮细胞转分化中的作用及机制研究

目的 研究Smad锚着蛋白(SARA)在高葡萄糖诱导的HK-2细胞转分化中的作用及相关机制.方法 用高浓度葡萄糖(30 mmol/L D-葡萄糖)刺激HK-2细胞,分别采用细胞免疫荧光、Western印迹及实时定量PCR等方法检测HK-2细胞波形蛋白(vimentin)、紧密连接蛋白(ZO-1)、SARA、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2及Smad3的表达.分别转染全长SARA质粒[SARA (WT)]及敲除SBD结构域的SARA质粒[SARA(dSBD)],检测转染后高糖诱导的HK-2细胞Vimentin、ZO-1、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3表达的变化.结果 高糖刺激时,HK-2细胞出现转分化 ;ZO-1蛋白和mRNA表达呈时间依赖性下调 ;vimentin蛋白和mRNA表达呈时间依赖性上调,而SARA蛋白和mRNA表达呈时间依赖性下调 ;TGF-β1、Smad3蛋白和mRNA表达呈时间依赖性上调 ;Smad2 mRNA表达呈时间依赖性上调,而其蛋白表达呈时间依赖性下调 ;Smad2和Smad3磷酸化,Smad3活化时间更长.与高糖刺激组相比,转染全长SARA质粒[SARA (WT)]过表达SARA使HK-2细胞ZO-1表达上调(P＜0.05) ;vimentin表达下调(P＜0.05) ;Smad2蛋白表达上调,但mRNA表达无明显变化 ;Smad2活化时间延长.转染SARA(dSBD)质粒对高糖诱导的HK-2细胞ZO-1、vimentin、Smad2的表达无影响,对Smad2和Smad3的磷酸化亦无明显影响.结论 高糖诱导的HK-2细胞转分化过程中,TGF-β1信号通路活化,SARA的表达下调.过表达SARA可能通过上调Smad2的蛋白表达,延长Smad2活化时间,从而抑制TGF-β1信号传导,进而抑制高糖诱导的HK-2细胞转分化进程.     

SARA在高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中的表达变化

目的：建立高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化模型,检测肾小管上皮细胞转分化过程中Smad锚着蛋白（Smad anchor for receptor activation, SARA）的表达变化。方法：采用Western印迹和实时定量PCR检测细胞波形蛋白（vimentin）、紧密连接蛋白（Zona occludens-1, ZO-1）、SARA蛋白及其mRNA表达水平。结果：30 mmol/L D-葡萄糖刺激后,HK-2细胞vimentin蛋白及其mRNA水平呈时间依赖性升高,而ZO-1蛋白及其mRNA水平呈时间依赖性下降,此变化在高糖刺激48 h时最为显著。同时,SARA蛋白及其mRNA表达水平呈时间依赖性下降。结论：高糖可诱导HK-2细胞发生转分化,SARA可能作为保护因子参与了这一过程。     

16年腹膜透析的基础和临床研究回顾

总结16年以来中南大学湘雅二医院肾内科腹膜透析的基础与临床研究的经验与成果。在国内率先成功构建了腹膜透析及腹膜纤维化动物模型,分离、鉴定了腹膜间皮细胞;利用细胞、分子生物学方法,系统研究了腹膜透析液的生物相容性、腹膜间皮细胞透析损伤的分子机制与防治措施,观察了促纤维化细胞因子转化生长因子-β1(TGF-β1),结缔组织生长因子（CTGF）及过氧化物酶体增生物激活受体-γ（PPAR-γ)等在腹膜纤维化发病机制中的重要作用,并初步阐明了它们的基因表达调控机制。首次在腹膜透析研究领域中利用纳米载体介导TGF-β1-shRNA与pCTGF-shRNA质粒在腹膜细胞与组织中的表达。在临床研究方面,研究了腹膜透析置管定位新方法、腹膜透析溶质转运特点及其机制、腹膜透析治疗模式及其他并发症的防治。     

微小RNA在糖尿病肾病发病机制及治疗中的研究进展

微小RNA（microRNAs,miRNA）可在转录后水平调控基因表达。最新研究表明miRNA与糖尿病肾病肾纤维化、足细胞损伤、系膜增生、微血管病变等密切相关,在糖尿病肾病的发病中可能起着必不可少的作用。深入研究miRNA可能为糖尿病肾病的诊断和治疗带来全新的方法。     

Smad锚着蛋白在高糖诱导人肾小管上皮细胞细胞外基质沉积中的作用

目的:阐明Smad锚着蛋白(Smad anchor for receptor activation,SARA)在高葡萄糖诱导的人近端肾小管上皮细胞系(HK-2细胞)细胞外基质(ECM)沉积中的作用及分子机制,探讨以SARA为靶点抑制高葡萄糖诱导的HK-2细胞ECM沉积的策略.方法:用高浓度葡萄糖(30 mmol/L D-葡萄糖)刺激HK-2细胞,通过Western Blot及实时定量PCR( Real-time PCR)检测纤维连接蛋白(FN)和I型胶原(Col I),进而检测转化生长因子β1( TGF-β1)、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3的表达变化,通过细胞免疫荧光、Western Blot、Real-time PCR检测SARA的表达变化;分别转染全长SARA质粒[SARA(WT)]及敲除SBD结构域的SARA质粒[SARA(dSRD)],检测转染后高糖诱导HK-2细胞FN及Col I表达的变化.结果:Western Blot及Real-time PCR结果显示,30mmol/L D-葡萄糖刺激后,HK-2细胞Col I蛋白及mRNA表达呈时间依赖性升高.高糖可诱导TGF-β1、Smad3蛋白及其mRNA表达呈时间依赖性上调;Smad2 mRNA表达呈时间依赖性上调,而其蛋白表达呈时间依赖性下调;高糖可促进Smad2和Smad3磷酸化,但Smad3的活化时间更长.而SARA的蛋白及mRNA表达呈时间依赖性降低,细胞免疫荧光结果亦证实高糖刺激后SARA表达下降.与高糖组相比,转染SARA(WT)可使HK-2细胞FN和 Col I表达下调;转染SARA (dSBD)对高糖诱导的HK-2细胞FN和ColI表达无明显影响.结论:高糖诱导的HK-2细胞ECM沉积过程中,TGF-β1信号通路活化,SARA的表达下调;过表达SARA可能通过上调Smad2的蛋白表达,抑制TGF-β31信号传导,从而减少高糖诱导的HK-2细胞ECM分泌.